Опубликовано в журнале “Химия и жизнь”

1992, №5, стр.36-37

О методике дифференцирования

волос и шерсти приматов

Г.В.Синельникова

Предисловие редакции журнала:

Снежный человек, похоже, существует!

Эка невидаль, подумает читатель, все мы теперь — снежные люди, ибо стали эндемиками уникального биотопа под названием СНГ, снеговиками, то есть, и снегурочками. Но нет, речь пойдет не о простых обитателях этого фантасмагорического снежного королевства, а о том самом, допутчевом гоминоиде, известном в народе как алмасты, йети и под другими псевдонимами.

Сразу предупредим, что живым или мертвым снежного человека пока никто не поймал, но мы не собираемся в очередной раз морочить вас его следами, рассказами очевидцев и прочей атрибутикой этой волнующей темы.

Пробираясь темными ночами мимо палаточных стоянок криптозоологов, объект (так ловцы гоминоида называют снежного человека, вероятно, чтобы не сглазить) оставляет на ветках и колючках кустов клочки своей неандертальской шерсти. Выспавшись, умывшись и позавтракав, криптозоологи отправляются на поиски. Нет, нет, они не настолько наивны, чтобы искать сам объект, они ищут отпечатки его лап, просим прощения, его фекалии, шерсть. Но первые два вида косвенных доказательств всегда трактуются неоднозначно, тогда как волоски шерсти выдают снежного человека с головой. Если, разумеется, попадут в руки специалиста-антрополога и если специалист правильно распорядится бесценными образцами.

Похоже, это удалось Галине Вячеславовне Синельниковой, которая исследовала белковый состав волос снежного человека, любезно предоставленных ей московскими криптозоологами. Ниже мы публикуем выдержки из статьи Г.В.Синельниковой, которую, мы все же надеемся, опубликует целиком академический журнал соответствующего профиля. Неспециалисты могут без ущерба для понимания смысла пропустить раздел “Материал и методика”, а специалисты, прочитав его, получат возможность повторить эксперименты Синельниковой. Именно поэтому мы и не пытались перевести научную статью на язык научно-популярный, как это принято в нашем журнале.

**************

 

 

аннотация

Предложен вариант методики изучения кератинов волос чело века и шерсти приматов при помощи изоэлектрического фокусирования в полиакриламидном геле (ПААГ). Методика позволяет выявлять существенные различия между образцами шерсти приматов разных таксонов, а для человека — статистически достоверно выделять расовые и этнические особенности.

ВВЕДЕНИЕ

Кератины — основная группа структурных белков волос человека и шерсти животных. В эту группу входят как волокнистые, так и аморфные белки.

Обычно в экстракте полипептидов волос и шерсти выделяют две фракции. Одна имеет относительно высокую молекулярную массу и низкое содержание серы (a -кератины), другая отличается низкой молекулярной массой и высоким содержанием серы (b -кератины). a -кератины составляют основную массу микрофибрилл волос и шерсти, а их матрикс состоит главным образом из b -кератинов.

Разнообразие картин распределения кератиновых полипептидов при электрофоретическом фракционировании обусловлено не только количественным соотношением микрофибрилл и мат-рикса. но и различиями в количественном и качественном составе обеих групп кератиновых полипептидов. Кроме того, разные кератиновые образования (например, шерсть и волосы) значительно отличаются друг от друга по содержанию высокосернистых (с большой концентрацией аминокислоты цистина) белков, а высокотирозиновые (богатые тирозином и глицином) белки характерны лишь для шерсти, в структуре волос человека они практически отсутствуют. Кератиновые образования разных особей одного вида дают практически одинаковую электрофоретическую картину. В то же время для разных кератиновых образований, например, волос и ногтей, одного и того же индивидуума отмечены существенные различия электрофореграмм...

МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА

Проанализировано 127 образцов шерсти 24 видов обезьян (в том числе 13 образцов шерсти человекообразных обезьян). Дополнительно изучены 30 образцов волос человека различной этнической принадлежности (русские, украинцы, евреи, цыгане, пенджабцы, белуджи, брагуи, буряты, нганасаны, эвены, чукчи, негры Конго, Заира, ЮАР, Танзании, Нигерии, Мали), а также 20 образцов волос (шерсти?) из коллекции Российского общества криптозоологов.

Экстракцию кератинов проводили по базовой методике Marshall et al. в модификации Garracedo. Для увеличения степени экстракции температуру экстрагирующего раствора подняли до 45 °С, увеличив при этом навеску образца до 2 мг. Оптимальное время экстракции составляло 42 часа при рН экстрагента — 10,4. Для разрушения дисульфидных связей использовали дитиотрейтол (ДТТ).

Фракционирование кератинов проходили путем изоэлектрического фокусирования (ИЭФ). На первом этапе исследования применили ИЭФ в ультратонком ПААГ на стеклянных пластинках по Христову. Однако эта техника приводила к неудовлетворительному разрешению при рН выше 7,0. Тогда к стандартному в данном случае набору амфолинов добавили амфолин диапазона 7-9. В результате соотношение компонентов в смеси амфолинов стало следующим: рН 3,5 - 5,0 (28,6 %); рН 4,0 -6,0 (21 %); рН 5,0 - 7,0 (14,7 %); рН 7,0 - 9,0 (14,7 %); рН 3,5 - 10 (21 %). Общее же количество амфолинов осталось прежним — 3 % от объема гелевого раствора. Чтобы упростить процедуру получения ультратонкого ПААГ, вместо стеклянных пластин в качестве подложки стали использовать полиэфирные пленки Cel-Bond (LKB), что позволило окрашивать электрофореграмму не по Merril at al., а по методике Sammons et al., обеспечивающей, во-первых, цветное, а во-вторых, более четкое прокрашивание зон. При толщине геля 0,6 мм оптимальное время обработки серебром составляет 3 часа. Максимальная цветность достигается через 8 - 12 часов после обработки раствором Na2CO3. В дальнейшем, через несколько месяцев, препарат тускнеет и начинает обесцвечиваться.

Максимальная четкость электрофоретической картины в области 12-16-й условных фракций достигалась при добавлении в гелевый раствор цвиттер-ионовых биологических сепараторов MES и HEPES (Serva). Реагенты вносили после деаэрации раствора перед добавлением в него NNN'N'-тет-раметилэтилендиамина (ТЕМЕD) и персульфата аммония. На цветность электрофоретической картины эти добавки не влияли.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Считаем целесообразным сообщить о двух аномальных образцах коллекции Российского общества криптозоологов. Согласно информации криптозоологов, эти образцы были собраны на Кавказе и в горах Средней Азии.

Общая интенсивность условных фракций и четкость рисунка на всем протяжении фореграммы позволяют считать эти образцы волосами приматов. Ближе всего электрофоретические картины этих образцов к фореграммам высших приматов, но от человекообразных обезьян их отличает сложный рисунок в области 14-й фракции. В то же время ряд признаков (повышенная интенсивность 5-й условной фракции, иное значение pI — изоэлектрической точки11-й фракции, аномалии рисунка в области 12-14-й фракций) не позволяют отнести эти образцы к человеческим (см. рис.).

Есть основания полагать, что в горах Кавказа и Средней Азии обитает примат, таксономически близкий к человеку и человекообразным обезьянам.

 

Рис. Электрофореграммы образцов шерсти приматов и волос людей:

1-5 ¾ гиббоны;
6-10 ¾ орангутаны;
11-12 ¾ шимпанзе;
13 ¾ горилла;
14 ¾ снежный человек;
15-21 ¾ люди разных этнических групп.

 

Послесловие редакции

После того как основные исследования были завершены, Галина Вячеславовна решила проверить еще один вариант: а что, если в коллекции криптозоологов оказались клочья шерсти медведя, или яка, или снежного барса, или горного козла, или, наконец, обычного барана? И хотя электрофореграммы явно говорили, что волосы, если не человеческие, то уж точно обезьяньи, Г.В.Синельникова провела анализ образцов шерсти всех видов крупных млекопитающих, которые обитают в горах Кавказа и Средней Азии. И, как показали фореграммы, ничего похожего. Так что из всех возможных объяснений остались лишь два варианта: либо в горы Кавказа и Средней Азии бегут человекообразные обезьяны из местных зоопарков, либо...

 

К публикации в Интернет подготовил М.Трахтенгерц